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NCI-H441細胞

產(chǎn)品簡介

NCI-H441細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體MuRF1/Trim63/FITC 熒光素標記肌肉特異性泛素蛋白連接酶1抗體IgG
G蛋白偶聯(lián)受體15抗體MTF-1/FITC 熒光素標記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):615
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產(chǎn)品名稱:肺腺癌細胞;NCI-H441
英文簡稱:NCI-H441細胞

貨號:LZ-X968393
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺;

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
犬調(diào)節(jié)正常T表達和分泌因子(RANTES)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 四苯溴化膦荔枝拉丁屬名: Issatchenkia orientalis

犬質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒四苯溴化膦東方伊薩酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

α1抗胰蛋白酶(α1-AT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒四苯溴化膦色串孢屬拉丁屬名: Colletotrichum fructicola

犬白分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三硅乙酯棲果盤孢拉丁屬名: Corynebacterium  stationis

犬白介素18(IL-18)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三硅乙酯停滯棒桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

犬叢生蛋白(CLU)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-羥-8-氧喹啉-3-羧乙酯枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Staphylococcus hominis

犬干因子(SCF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-羥-8-氧喹啉-3-羧乙酯葡萄球菌拉丁屬名: Aureimonas glaciei

犬白介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-氨-1-環(huán)己冰川金色單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

犬白介素12 p40(IL-12 p40)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-氨-1-環(huán)己褐紅小孔菌拉丁屬名: Rhodanobacter panaciterrae

犬孕激素/孕(Pg)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-氨-1-環(huán)己紅細菌屬注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1-(2-氨乙)哌啶Corynebacterium variabile拉丁屬名: Leisingera nanhaiensis

β干擾素(IFN-β)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-(2-氨乙)哌啶南海雷*氏菌拉丁屬名: Streptomyces thermoolivaceus subsp. fuscus

犬白介素12(IL-12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴乙三溴化銨熱橄欖鏈霉菌褐色變種拉丁屬名: parasuis

犬狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴乙三溴化銨副豬嗜血桿菌拉丁屬名: Lophodermium sichuanense

犬促狀腺素α亞(TSHA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3--2-環(huán)戊烯-1-四川散斑殼拉丁屬名: Pichia deserticola

犬纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3--2-環(huán)戊烯-1-沙漠畢赤酵母拉丁屬名: Streptomyces griseus
NCI-H441細胞雞多巴受體D3(D3R/DRD3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-GRP78/FITC  熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體78抗體IgG

雞葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-GR /FITC  熒光素標記糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG

雞載脂蛋白C2(ApoC2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC  熒光素標記GPNMB抗體IgG

γ干擾素誘導(dǎo)單核因子(MIγ/CXCL9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG

雞膠原酶II(Collagenase II)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-GRB2/ASH /FITC  熒光素標記生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體IgG

雞封閉蛋白9(CLDN9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-GPR109A/HM74A/FITC  熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgG

雞血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-GRB10/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG

SPARC樣蛋白1(SPARCL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG


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