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禽腎炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格

產(chǎn)品簡介

禽腎炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
TSST-1檢測試劑盒
用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng)(GB4789.4-2010 ,GB4789.40-2010,SN0170-92和GB13091-91,ISO標(biāo)準(zhǔn))...緩沖蛋白胨水(緩沖胨水增菌液) (BPW)

更新時間:2021-03-14
訪問次數(shù):550
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 禽腎炎病毒通用PCR檢測試劑盒價格

 英文名稱

 Avian Nephritis Virus(ANV)RTPCR

 貨號

 LZP6401

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)elisa試劑盒Anti-CTSE Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)  

大鼠抵抗素(Resistin)elisa試劑盒Anti-CTSG Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)  

大鼠超氧化物歧化酶1 可溶性(SOD1)elisa試劑盒Anti-CTSG Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)  

大鼠白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)elisa試劑盒Anti-CTSG Antibody(原貨號PB1105)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

大鼠白三烯C4(LTC4)elisa試劑盒Anti-CTSK Antibody(原貨號PB0891)研究領(lǐng)域  心血管 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體  

大鼠白三烯B4(LTB4)elisa試劑盒Anti-CTSL1(Cathepsin L1) Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 新陳代謝  

大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)elisa試劑盒Anti-CUL1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶  

大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)elisa試劑盒Anti-CUEDC2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) b-淋巴細(xì)胞  

大鼠E3-RSIκB elisa試劑盒Anti-CUL1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞表面分子  

大鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa試劑盒Anti-CUL1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 糖尿病 內(nèi)分泌病 新陳代謝  

魚細(xì)胞色素C氧化酶(COX)elisa試劑盒Anti-CTTN Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 線粒體  

魚褪黑素(MT)elisa試劑盒Anti-CUL2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體  

魚催乳素(PRL/LTH)elisa試劑盒Anti-CUL3 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝  

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞價格Anti-CUL4B Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白信號 干擾素  

人顱蓋造骨細(xì)胞價格Anti-CUL2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)  

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