熒光定量PCR試劑盒采用標(biāo)本RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)-實(shí)時(shí)熒光擴(kuò)增(PCR)兩步合并單管反應(yīng),操作簡(jiǎn)便；采用熒光染料的實(shí)時(shí)定量PCR,靈敏度高于熒光探針PCR一個(gè)數(shù)量級(jí),每個(gè)反應(yīng)達(dá)10個(gè)拷貝/次；自主產(chǎn)權(quán)不形成二聚體的引物設(shè)計(jì)使PCR反應(yīng)背景干凈,特別對(duì)于極低濃度病毒樣本定量準(zhǔn)確,對(duì)弱陽(yáng)性判讀可靠；選取人腸道病毒(EV)最保守的5’端非編碼區(qū)特異序列5’UTR(423-440)反意義鏈作為逆轉(zhuǎn)錄引物和PCR下游引物,5’UTR(191-208)序列為PCR上游引物,擴(kuò)增產(chǎn)生250bp片段,特異性達(dá)100%；聚合酶熱啟動(dòng)、中間同序引物對(duì)等優(yōu)化措施使系統(tǒng)重復(fù)性好。